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如何喚醒冷凍胚胎?

作者/優(yōu)孕baby
2020-05-31 前往泰國馬來

來源/優(yōu)孕行

胚胎的解凍與冷凍相反,是將胚胎從超低溫狀態(tài)下恢復至正常生理狀態(tài)的過程。

解凍主要有兩個過程,一個是復溫,一個是去除冷凍保護劑,較終達到恢復胚胎生理活性及繼續(xù)發(fā)育的目的。復溫一般采用較快的升溫速度,避免在中間產(chǎn)生一些冰晶對胚胎造成損傷,胚胎冷凍時,胚胎中滲透了高濃度的冷凍保護劑,復溫后需及時將其去除,使水分能替代保護劑滲入細胞內,因此解凍劑中含有一些非滲透性保護劑,胚胎可逐步吸收水分,并將冷凍劑從胚胎細胞中滲出,且不會因水分吸收過快而導致細胞膜內外滲透壓劇烈變化,對胚胎造成損傷。

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胚胎解凍時選擇何種方法需依據(jù)胚胎冷凍時選擇的方法,不同的冷凍方法不僅冷凍原理有差別,且胚胎裝載的方式也完全不同,因此解凍時也需采用不同的解凍方法和程序,如胚胎冷凍常用兩種方法,一種是程序冷凍法,一種是玻璃化冷凍法。在程序冷凍法中,胚胎是裝載在充滿冷凍液的冷凍管中,降溫過程也是按照一定的速率較緩慢的降到一個穩(wěn)定的溫度,約在-35℃到-80℃之間,再投入液氮,整個過程大概需兩個小時,解凍時也需用程序的解凍法,復溫的速度雖要求較快,但為避免體積和溫度急劇變化導致胚胎受損,則需將冷凍管從液氮取出后,先在空氣中停留一段時間,然后再升溫到37℃,而玻璃化冷凍時,胚胎是在高濃度的冷凍保護劑中進行短時間平衡后,使用極少量的保護劑,再將它們裝載在導熱性較好的載體上,直接被投入液氮中,胚胎瞬間被冷凍,從生理溫度降至-196℃,整個冷凍過程僅7-8分鐘,玻璃化解凍時復蘇溫度也極快,胚胎從液氮中取出后,立即從-196℃直接升溫至生理溫度。

總之,解凍方法需與冷凍時的方法相對應,這樣更有利于胚胎的復蘇及生理功能的恢復,不恰當?shù)膹吞K方法會對胚胎造成較大的損傷。


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